質粒轉染試劑
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一、產品簡介:
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二、產品概述：
VGF是一種多聚陽離子聚合物，具有較高的陽離子電荷密度使得聚合物網絡在任何 pH下都能充當有效的“質子海綿”(proton sponge)體。這種聚陽離子能將各種報告基因轉入各種種屬細胞，其效果好于脂質聚酰胺，經進一步的改性后，其轉染性能好于樹枝狀聚合物，而且它的細胞毒性低。
三、使用方法：
大部分細胞系所使用的DNA(μg）與VGF（μg）的比值為1:3或 1:4，轉染狀態良好的細胞可獲得高轉染效率、高表達水平和低細胞毒性。下面以24孔板培養的哺乳動物細胞為例：
3.1 貼壁細胞：轉染前一天每孔0.5-2×10E5個細胞接種于 500 μL培養基中，在轉染時細胞可長至90-95%匯合度。
懸浮細胞：在配制轉染液前每孔4-8×10E5個細胞接種于500 μL培養基中。
3.2 轉染液制備，每孔細胞用量如下：
A. 用50 μL DMEM培養基 （或其他無血清培養基） 稀釋質粒DNA，輕輕混勻。
B. 取適量VGF在50μL DMEM培養基中稀釋，室溫孵育5min。
C. 將前兩步所稀釋的DNA和VGF混合，輕輕混勻，室溫放置30min。
3.3 在每孔細胞中加入混合后的轉染液，輕輕搖勻。
3.4 貼壁細胞可在轉染4-6h后可更換培養基，懸浮細胞可在轉染后的18-48h之間，對細胞進行換液。轉染18-48h之后可檢測基因表達。如果檢測蛋白表達， 請在轉染后24-72h收集細胞樣品。
3.5 對于穩定轉染，在轉染24h后以1:10傳代培養，第二天可加入選擇培養基。
四、VGF與其他轉染試劑的效果：
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