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維真生物 sgRNA文庫

 基因敲除是實現功能缺失型篩選的重要手段，已被廣泛應用于靶向藥物研究、抗性基因篩選、基因功能研究、基因組轉錄激活研究及蛋白質運輸及定位等方向。

 目前已經廣泛應用的RNAi技術的靶標是mRNA，而CRISPR通過RNA識別DNA序列然后再改變DNA序列，是可以遺傳的。由于編碼mRNA的DNA序列只占總DNA的極少部分，因此靶向DNA序列的CRISPR的靶標要比RNAi廣得多，更有可能篩選出針對某DNA序列的特異CRISPR靶標。

 在CRISPR/Cas9系統中，sgRNA 與 Cas9 核酸內切酶的復合物能在目的片段生成DNA雙鏈斷裂（double-strand breaks,DSBs），誘發由非同源末端連接（NHEJ）修復機制造成的移碼突變。CRISPR/Cas9系統可同時沉默多個基因，并具有十分廣泛地應用范圍，已報道成功應用于細菌、酵母菌、植物、魚類和哺乳動物中。目前，更加便捷高效的CRISPR sgRNA 文庫已逐漸取代 shRNA 文庫。

 維真生物的人源基因sgRNA慢病毒文庫及小鼠基因sgRNA AAV文庫配合維真提供的Cas9穩定表達細胞系，將助您在更短的時間內實現高通量篩選！

一、 維真生物 sgRNA文庫相關產品及服務

1. sgRNA質粒/病毒

2. Cas9穩轉株

3. Cas9穩轉株構建服務

維真生物可根據您實驗所需，針對您實驗目的細胞，構建Cas9穩轉株。詳情可聯系銷售人員。

二、 維真生物 Cas9的活性檢測

Cas9的活性檢測，可以通過Cas9質粒轉染細胞后觀察測序結果中的套峰來實現。

 Cas9會在識別位點造成DNA雙鏈斷裂，斷裂處通過易錯修復，易造成隨機突變。正因如此，通過識別位點上下游引物進行PCR后，產物實為兩類PCR產物的混合物，分別是原本序列的PCR產物和突變序列的PCR產物。通過對PCR產物進行測序，將會出現套峰樣結果，表明Cas9為有活性的。如未觀察到套峰，表明Cas9沒有活性或活性極低。

三、sgRNA文庫高通量篩選技術及其優勢

 SgRNA 文庫高通量篩選技術，指的是利用sgRNA質粒/病毒文庫，感染cas9穩定表達細胞系，進而達到高通量篩選的目的。

 相比傳統shRNA文庫，sgRNA文庫具有無可比擬的優勢。不僅在操作上節約時間成本，還具有更廣泛的應用范圍和更卓越的修飾效果。