自2022年5月(yue)以來,多國陸(lu)續發現猴痘(dou)(dou)病(bing)例,并迅速向全(quan)球(qiu)蔓延。7月(yue)23日(ri),世界衛生組(zu)織(WHO)宣布,猴痘(dou)(dou)疫情已構成(cheng)“國際關注(zhu)的突發公共衛生事(shi)件”,這是世衛組(zu)織針(zhen)(zhen)對全(quan)球(qiu)突發公共衛生事(shi)件發出的最高(gao)級(ji)別警報。雖然,針(zhen)(zhen)對天花(hua)病(bing)毒的疫苗和藥物為應(ying)對猴痘(dou)(dou)提供了選擇,但目(mu)前尚沒有針(zhen)(zhen)對MPV的特異性疫苗和特效藥物。維真生物積(ji)極響應(ying),開發出可(ke)用于(yu)MPV核酸檢測試劑盒性能測試的假病(bing)毒系列產(chan)品,助力猴痘(dou)(dou)致病(bing)機理及防治等相關研究。
維真生物基于全面的病毒包裝平臺和穩定的生產工藝,將Monkeypox Virus (MPV)特異性靶標序列F3L和包膜蛋白B6R的基(ji)因序列,分別克隆構建至慢病(bing)(bing)毒(du),腺病(bing)(bing)毒(du)和腺相關病(bing)(bing)毒(du)(AAV)載(zai)體上,成功開(kai)發出高質量的猴痘假病(bing)(bing)毒(du)系(xi)列產品,并且(qie)具有良好的生物(wu)安全性和穩定性。
貨號 | 名稱 | 規格 |
---|---|---|
MVLV10001 | pLenti-Monkeypox Virus-B6R假病毒 | ≥1*10E8TU/ml, 1ml |
MVLV10002 | pLenti-Monkeypox Virus-F3L假病毒 | ≥1*10E8TU/ml,1ml |
MVAD10001 | pADM-Monkeypox Virus-B6R假病毒 | ≥1*10E10pfu/ml,1ml |
MVAD10002 | pADM-Monkeypox Virus-F3L假病毒 | ≥1*10E10pfu/ml, 1ml |
MVAV10001 | pAV-Monkeypox Virus-B6R假病毒 | ≥5*10E12vg/ml,1ml |
MVAV10002 | pAV-Monkeypox Virus-F3L假病毒 | ≥5*10E12vg/ml 1ml |
*除上述F3L和B6R的載體和病毒產品外,我們還可以提供其他猴(hou)痘(dou)相(xiang)關基因的載體(ti)構建與病毒包(bao)裝定制服務,助力猴痘病毒的研究,歡迎各位老師垂詢!
用(yong)于猴痘病毒核(he)酸檢測試劑(ji)盒的開發和性(xing)能評價,效果驗證(zheng),作為(wei)qPCR實驗的陽性(xing)標(biao)準(zhun)品(pin)使用(yong)。
猴(hou)痘(dou)(dou)病毒(du)(du)(monkeypox virus,MPV) 屬于痘(dou)(dou)病毒(du)(du)科正痘(dou)(dou)病毒(du)(du)屬,同屬的(de)還有天花病毒(du)(du)、牛痘(dou)(dou)病毒(du)(du)和(he)(he)痘(dou)(dou)苗病毒(du)(du)。MPV是一(yi)種有包膜(mo)的(de)線性雙(shuang)鏈DNA病毒(du)(du),基因組大小(xiao)約(yue)197kb,被(bei)包裹在直徑(jing)為(wei)140-260nm多晶的(de)啞(ya)鈴形核內,病毒(du)(du)顆粒呈(cheng)磚形或橢圓形。MPV基因組有一(yi)個高度保守的(de)中央編(bian)碼區,約(yue)56-120 kb,兩側是可變區域和(he)(he)末端重復序(xu)列。根據遺傳(chuan)、地(di)(di)理和(he)(he)表型變異,該(gai)病毒(du)(du)有兩個不同的(de)分支,即西非(fei)和(he)(he)剛果盆地(di)(di),后者也被(bei)稱為(wei)中非(fei)分支,毒(du)(du)性最強。通過(guo)全基因組測序(xu)已獲知本次疫情傳(chuan)播(bo)的(de)病毒(du)(du)屬于較溫和(he)(he)的(de)西非(fei)分支。
MPV引起的(de)(de)人(ren)類(lei)疾病(bing)癥(zheng)狀(zhuang)與天(tian)(tian)花(hua)相似,但其(qi)致命性和(he)傳染(ran)性不如(ru)天(tian)(tian)花(hua)病(bing)毒。猴痘潛伏期(qi)為5-21天(tian)(tian),最先是(shi)發熱階段(duan),通常持續(xu)1至3天(tian)(tian),癥(zheng)狀(zhuang)包括(kuo)發熱、寒戰(zhan)、劇烈頭(tou)痛(tong)、淋巴結腫大、背部(bu)疼痛(tong)、肌肉疼痛(tong)和(he)疲勞(lao)至極。發熱期(qi)過后是(shi)皮(pi)疹(zhen)期(qi),通常持續(xu)2-4周,患(huan)者先是(shi)面部(bu)出現皮(pi)疹(zhen),隨后擴散到身體(ti)其(qi)他(ta)部(bu)位(wei),皮(pi)疹(zhen)病(bing)變由斑疹(zhen)(基底扁(bian)平)演變為丘疹(zhen)(隆起、堅(jian)硬、疼痛(tong))、小泡(充滿透明液(ye)(ye)體(ti))、膿皰(充滿膿液(ye)(ye)),最后是(shi)結痂。根據感染(ran)MPV的(de)(de)分支和(he)醫療情況,MPV致死(si)率(lv)為0~11%,幼兒死(si)亡率(lv)更高。
與多數DNA病毒(du)(du)不同,MPV在(zai)受(shou)感(gan)染細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)的細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)質內(nei)復(fu)制,而非細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)核內(nei)。MPV復(fu)制過(guo)(guo)程中(zhong)(zhong)產生(sheng)兩種感(gan)染性(xing)病毒(du)(du)顆粒:細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)內(nei)成(cheng)熟病毒(du)(du)(MV)和(he)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)外包(bao)膜(mo)病毒(du)(du)(EV),其中(zhong)(zhong),MV通(tong)過(guo)(guo)微胞(bao)(bao)(bao)飲或膜(mo)融(rong)合進入細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao),而EV通(tong)過(guo)(guo)膜(mo)融(rong)合進入。MV外有一層(ceng)脂(zhi)蛋白包(bao)膜(mo),包(bao)裹病毒(du)(du)核心(xin)和(he)包(bao)含蛋白質的側體,在(zai)外界環境中(zhong)(zhong)相對穩定,主(zhu)要參與介(jie)導宿(su)主(zhu)之間(jian)的傳播(bo);EV由脂(zhi)質膜(mo)包(bao)裹MV外周(zhou)形(xing)成(cheng),它來源(yuan)于高爾基(ji)體或核內(nei)體。在(zai)胞(bao)(bao)(bao)質內(nei)完(wan)成(cheng)病毒(du)(du)DNA的復(fu)制和(he)病毒(du)(du)蛋白的組裝后,MV經(jing)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)裂解被(bei)釋放,而EV則(ze)通(tong)過(guo)(guo)胞(bao)(bao)(bao)吐作用離開細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)。
值得注意(yi)的是(shi),MPV的復制,轉錄,組裝和(he)釋(shi)放過(guo)程由多(duo)個不同的蛋(dan)白質參與(yu)。
猴痘是一(yi)種人畜共患病,即(ji)一(yi)種由動(dong)物(wu)傳(chuan)播給人類的疾病。目前(qian),MPV的宿主仍不清楚(chu),非洲的嚙齒動(dong)物(wu)可能參與了MPV感染(ran)(ran)(ran)傳(chuan)播。MPV可通過(guo)接(jie)觸受(shou)感染(ran)(ran)(ran)動(dong)物(wu)的體(ti)液、病變皮膚或(huo)內(nei)部(bu)粘膜、呼吸道飛沫或(huo)受(shou)感染(ran)(ran)(ran)物(wu)品(pin)進行傳(chuan)播。
由于MPV感(gan)染的臨(lin)床表現難以與(yu)其他痘病毒(du)引(yin)起(qi)的疾病區分(fen)。因此,快速有(you)效(xiao)的實驗室(shi)檢測方法(fa)對控制(zhi)MPV的暴發流行至關(guan)重要。
①PCR
PCR技(ji)術(shu)是檢(jian)測(ce)猴痘病毒DNA的(de)首(shou)選(xuan)方(fang)法。一般來說,通(tong)常選(xuan)擇胞外包膜蛋白(bai)基(ji)因(B6R)、DNA聚合(he)酶(mei)基(ji)因E9L,DNA依賴的(de)RNA聚合(he)酶(mei)亞基(ji)18 (RPO18)基(ji)因以及補(bu)體結(jie)合(he)蛋白(bai)C3L、F3L和N3R基(ji)因的(de)保(bao)守(shou)區域作為PCR擴(kuo)增的(de)靶標。PCR診斷標本(ben)可(ke)直(zhi)接來自皮疹(zhen)——皮膚、液(ye)體或痂皮。此外,重組(zu)酶(mei)聚合(he)酶(mei)擴(kuo)增(RPA)、環介導(dao)等溫擴(kuo)增(LAMP)技(ji)術(shu)和限制性長度片(pian)段多態性(RFLP) 技(ji)術(shu)也已被開發用(yong)于MPV DNA 檢(jian)測(ce)。
②血清學實驗
酶聯免疫(yi)吸(xi)附試驗(ELISA)可檢測患者血清中的特異性IgM和(he)IgG 抗體。由于MPV與其他痘病毒之間存在(zai)抗原交叉反應,此方(fang)法特異性較低(di)。
③電鏡觀察
可利用(yong)電鏡觀察病毒(du)(du)的形態特征,同樣地(di),由于MPXV和其他痘(dou)病毒(du)(du)在形態上無(wu)法(fa)區分,該方法(fa)缺乏準確性。此外,電鏡觀察靈敏度(du)不高且樣品制備(bei)復雜,周期較(jiao)長。
④其他方法
免疫化學分析(xi)和多重(zhong)免疫熒光成(cheng)像(xiang)可用于MPV抗原檢測。
大多數人(ren)(ren)類猴痘(dou)感染最初是(shi)由動物向人(ren)(ren)傳播(bo)造成的(de),應避免(mian)接觸患病(bing)或死亡的(de)動物,同時避免(mian)與感染者或受污(wu)染物質密切(qie)接觸。目(mu)前,還沒有針對MPV感染的(de)特(te)異性(xing)(xing)疫(yi)(yi)苗和特(te)異性(xing)(xing)藥物。據(ju)報道(dao),天(tian)(tian)花(hua)(hua)疫(yi)(yi)苗可對猴痘(dou)提供85%的(de)免(mian)疫(yi)(yi)保護。目(mu)前,預(yu)防天(tian)(tian)花(hua)(hua)病(bing)毒(du)和MPV的(de)兩種疫(yi)(yi)苗已(yi)獲批準(zhun):第二代疫(yi)(yi)苗ACAM 2000和第三代疫(yi)(yi)苗IMVAMUNE。此外,抗天(tian)(tian)花(hua)(hua)病(bing)毒(du)藥物也可發(fa)揮(hui)一定(ding)的(de)抗MPV作用。
1、//www.who.int/health-topics/monkeypox#tab=tab_1.
2、Kumar N, Acharya A, Gendelman HE, Byrareddy SN. The 2022 outbreak and the pathobiology of the monkeypox virus. J Autoimmun. 2022 Jul;131:102855. doi: 10.1016/j.jaut.2022.102855. Epub 2022 Jun 25. PMID: 35760647.
3、Gong Q, Wang C, Chuai X, Chiu S. Monkeypox virus: a re-emergent threat to humans. Virol Sin. 2022 Jul 9:S1995-820X(22)00120-1. doi: 10.1016/j.virs.2022.07.006. Epub ahead of print. PMID: 35820590.
4、Kabuga AI, El Zowalaty ME. A review of the monkeypox virus and a recent outbreak of skin rash disease in Nigeria. J Med Virol. 2019 Apr;91(4):533-540. doi: 10.1002/jmv.25348. Epub 2018 Nov 19. PMID: 30357851.