定點突變服務
基因定點突變是指通過聚合酶鏈式反應(PCR)等方法改變目的基因的序列,包括堿基的插入、缺失、點突變等。基因定點突變是基因研究中比較常用的方法,可以短時間內研究目的DNA所表達的目的蛋白的性狀及表征。維真生物為您提供如下定點突變服務,只要您將突變要求告知我們,突變模板直接郵寄給我們,或直接從我們已有的人源 ORF cDNA克隆現貨中選擇,我們即可協助您完成點突變服務及下游一系列服務,包括 分子克隆 、病毒包裝(腺病毒、慢病毒和AAV) 和基因表達分析等,節省您寶貴的科研時間。
服務編號 |
服務類型 |
規格 |
目錄價 |
貨期 |
WZ020001 |
單點突變 |
5ug質粒+500ul菌液 |
詢價 |
咨詢 |
WZ020002 |
多點突變 |
5ug質粒+500ul菌液 |
詢價 |
咨詢 |
*1. 6bp內堿基突變算一個突變位點; 2. 更換載體需要額外增加克隆費用。
*如您對上述服務感興趣,請您點擊“歡迎垂詢”留下您的信息,我們將為您提供具體實驗方案和項目價格。
相關服務: 腺病毒包裝 慢病毒包裝 腺相關病毒包裝 分子克隆 穩定細胞株建立
↓↓ 分以下幾個部分做詳細介紹 ↓↓ |
定點突變(site directed mutagenesis)可以隨心所欲地改變已知DNA序列中的堿基。根據堿基變化的情況,定點突變通常包括堿基置換(base substitution)、堿基缺失(deletion)和 堿基插入(insertion)三種。根據堿基變化后氨基酸是否改變,基因突變又可分為同義突變(same sense mutation)、錯義突變(missense mutation)和無義突變(nonsense mutation)。
在基礎研究中,研究者通常通過改變DNA序列獲得突變基因,以研究基因結構與功能之間的關系;或者通過改變氨基酸序列獲得突變蛋白,以研究蛋白質結構和功能的關系,從微觀水平闡明生理狀態下基因的調控機理、疾病的病因和發病機制。
PCR法進行定點突變的大致流程:設計突變引物;overlap PCR;DpnI酶(能夠識別甲基化位點并將其酶切)消化模板;DpnI酶處理過的PCR產物轉化;挑菌,測序驗證。其示意圖如下:
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1. | 突變模板即選即用:維真生物擁有2大人源基因質粒庫,包括人源ORF cDNA克隆和人源microRNA克隆; |
2. | 后續服務貼心:維真生物可以為您提供亞克隆、腺病毒包裝、慢病毒包裝、AAV包裝服務和基因表達分析等后續服務; |
3. | 價格公道、合理。 |
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1. 做點突變服務,我需要提供哪些材料以及信息?
需要提供的材料:
模版質粒≥5ug或有含有模板質粒的菌液;如果您還需要公司幫您做亞克隆,您還需提供含有目的載體的質粒或菌液;
需要提供的信息:
①模版基因名稱及序列(突變前序列),模版序列的測序結果;
②模版序列所在載體信息:載體全稱、大小及抗性;
③突變后基因名稱及序列;
*如果您還需要公司幫您做亞克隆,您還需提供目的載體信息:載體全稱,大小及抗性,如果是非商業化載體,需要提供載體全序列或圖譜;
2. 多長堿基內的突變算一個突變?
6bp內的突變算一個突變。
3. 如果我在突變的同時還需要更換目的載體,公司該如何收費?
如果您在定點突變的同時還需要更換目的載體,您需要額外支付亞克隆費用。