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基因沉默效果檢測

服務介紹

 基因沉默是基因表達調控的一種重要方式。它主要表現為特定基因的表達量下調或表達抑制。基因沉默主要包括兩方面:轉錄水平的基因沉默和轉錄后水平的基因沉默。前者主要由基因甲基化、異染色質化和位置效應等引起;后者由反義RNA和RNA干擾等引起。其中,RNA干擾技術憑借高效、特異的靶基因抑制在后基因組時代的基因功能研究和藥物開發中顯示了巨大的應用前景。它是一種由雙鏈RNA誘發的同源基因表達沉默的現象。在RNA干擾實驗中,由于siRNA所介導的基因沉默效率難以預料,因此,高效siRNA的選擇對于成功沉默或關閉基因表達是非常關鍵的。無論是特異siRNA沉默效果的檢測,還是高效siRNA的篩選,科研工作者均需要通過生物實驗手段來驗證。維真生物可以根據您的實驗需求提供個性化的基因沉默效果檢測服務。



服務內容

 維真生物可為客戶提供特異shRNA沉默效果檢測和高效shRNA篩選服務,具體信息詳見下表:

服務編號

服務類型

規格

目錄價

貨期

WZ090001

特異shRNA沉默效果檢測

實時定量PCR 推薦! Western blot

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WZ090002

高效shRNA篩選

實時定量PCR 推薦! Western blot

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相關服務: shRNA克隆 腺病毒包裝 慢病毒包裝 腺相關病毒包裝




沒有合適目的細胞進行高效shRNA篩選,怎么辦?

 科研工作者在做鼠源基因RNA干擾實驗時通常會遇到一個問題:沒有合適的目的細胞進行高效shRNA篩選,怎么辦呢?若沒有參考高效靶點,科研工作者通常會針對一個靶基因設計3-4條shRNAs。為了體外驗證shRNAs的特異性和高效性,我們可以將shRNAs質粒和靶基因的過表達質粒共同轉染HEK293細胞,通過分子生物學手段檢測靶基因的沉默表達情況。




服務流程







相關資料


維真生物質粒轉染試劑說明書

質粒轉染試劑說明書




siRNA干擾效率的影響因素


1. shRNA載體元件:比如loop環、shRNA的熱力學穩定性;
2. 靶基因性質:比如靶基因二級結構、靶基因微環境;
3. 實驗體系:比如靶細胞(原代細胞),轉染效率會比較低,選擇維真生物的病毒產品或病毒包裝服務可以解決此問題;轉染時間的控制,健康狀態的細胞有利于提高轉染效率;觀察時間的控制,觀察時間取決于靶蛋白的半衰期;轉染試劑和轉染步驟,也會影響轉染效率;
4. shRNA的脫靶性;
5. 生物體內蛋白表達補償途徑的存在。


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 備案號:    網址:www.wzbio.com.cn

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